Análisis del papel del pie de la RNA polimerasa II de Saccharomyces cerevisiae y su importancia en múltiples etapas de la transcripción

Abstract

[ES] Se conoce poco sobre los mecanismos que gobiernan el ensamblaje nuclear, estabilidad, degradación y reciclaje de la RNA polimerasa II. Demostramos que el pie de la RNA pol II es crucial para su ensamblaje y estabilidad, asegurando la correcta asociación de Rpb I-Rpb6 Y del dímero Rpb4/7. Mutaciones en el pie afectan al ensamblaje y estabilidad de la enzima, lo que es suprimido por la sobreexpresión de RPB6, provocan degradación nuclear de Rpbl dependiente de Rsp5 y conducen a alteraciones de diversas etapas transcripcionales. El defecto de ensamblaje altera la actividad transcripcional, la cantidad de enzima asociada a los genes, la fosforilación del CTD, la maquinaria de capping del mRNA, sugiere un incremento en la RNA pol II parada y altera la estabilidad del PIe. Los mutantes del pie muestran una respuesta a estrés así como una reducción en la cantidad de mRNA unidos a Rpb4/7 que altera su degradación

[EN] Little is known about the mechanisms governing the nuclear assembly, stability, degradation, and recycling of RNA polymerase II. We demonstrate that the foot ofthe RNA pol II is crucial for the assembly and stability ofthe complex, by ensuring the correct association of Rpb l-Rpb6, and of the dimer Rpb4/7. Mutations at the foot affect the assembly and stability ofthe enzyme, a defect that is offset by RPB6 overexpression, cause Rpbl degradation in the nuc\eus by an Rsp5-dependent mechanism, and leads to alterations in several transcription steps. Assembly defect alter transcriptional activity, the amount of enzyme associated with the genes, the CTD phosphorylation, interferes with mRNA capping machinery, suggest an increase in stalled RNA pol II and alter the PIC stability. Foot mutants show a stress response and a reduction in the amount of mRNA bound to Rpb4/7, affecting the mRNA decay.