Examinando por Autor "Abriouel, Hikmate"
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Ítem Análisis de la diversidad de resistomas y virulomas en un matadero a lo largo de la cadena de producción de la carne(Jaén : Universidad de Jaén, 2021-07-12) Campos-Calero, Guillermo ; Abriouel, Hikmate; Benomar El Bakali, Nabil; Caballero-Gómez, Natacha; Universidad de Jaén. Departamento de Ciencias de la SaludEn este estudio, se determinaron los patrones de resistoma y viruloma, con el fin de monitorear la posible contaminación a lo largo de la cadena de producción de la carne. Por medio de métodos dependientes e independientes de cultivo (metagenómica), se detectaron altos niveles de contaminación microbiana en superficies tanto de animales como de áreas de procesado. Además, se obtuvo una gran diversidad y abundancia de genes de resistencia a antibióticos (ARGs) y determinantes de virulencia (VRGs), lo cual supone un riesgo potencial para la salud pública. A continuación, se determinó la ecología microbiana y los genes funcionales asociados abundantemente con genes del estrés, especialmente en las primeras zonas de producción (zonas más contaminadas). Y para evitar la diseminación de los contaminantes microbianos y sus genes de resistencia/virulencia, se utilizó el desinfectante HLE que dio mejores resultados cuando se combinó con una limpieza previa con detergente.Ítem Antibiotic multiresistance analysis of mesophilic and psychrotrophic Pseudomonas spp. isolated from goat and lamb slaughterhouse surfaces throughout the meat production process(Science Direct (Elsevier), 2014-11) Lavilla, Leyre; Benomar El Bakali, Nabil; Casado-Muñoz, Maria Carmen; Gálvez-del-Postigo, Antonio; Abriouel, HikmateThe aim of this study was to investigate the phenotypic and genotypic antibiotic resistance profiles of pseudomonads isolated from surfaces of a goat and lamb slaughterhouse, which were representative of areas that are possible sources of meat contamination. Mesophilic (85 isolates) and psychrotrophic (37 isolates) pseudomonads identified at the species level generally were resistant to sulfamethoxazole, erythromycin, amoxicillin, ampicillin, chloramphenicol, trimethoprim, rifampin, and ceftazidime (especially mesophiles), as well as colistin and tetracycline (especially psychrotrophes). However, they generally were sensitive to ciprofloxacin, gentamicin, imipenem, and kanamycin regardless of species identity. Worryingly, in the present study, we found multidrug resistance (MDR) to up to 13 antibiotics, which was related to intrinsic and acquired resistance mechanisms. Furthermore, a link between various antimicrobial resistance genes was shown for beta-lactams and tetracycline, trimethoprim, and sulfonamides. The distribution and resistomebased analysis of MDR pseudomonads in different slaughterhouse zones indicated that the main sources of the identical or related pseudomonad strains were the animals (feet and wool) and the slaughterhouse environment, being disseminated from the beginning, or entrance environment, to the environment of the finished meat products. Those facts must be taken into consideration to avoid cross-contamination with the subsequent flow of mobile resistance determinants throughout all slaughterhouse zones and then to humans and the environment by the application of adequate practices of hygiene and disinfection measures, including those for animal wool and feet and also the entrance environment.Ítem Antibiotic resistance of Lactobacillus pentosus and Leuconostoc pseudomesenteroides isolated from naturally- fermented Aloreña table olives throughout fermentation process.(Science Direct (Elsevier), 2014-02-17) Casado-Muñoz, Maria Carmen; Benomar El Bakali, Nabil; Lavilla, Leyre; Gálvez-del-Postigo, Antonio; Abriouel, HikmateAntimicrobial resistance of Lactobacillus pentosus (n = 59) and Leuconostoc pseudomesenteroides (n = 13) isolated from Aloreña green table olives (which are naturally-fermented olives from Málaga, Spain) to 15 antibiotics was evaluated. Most Lb. pentosus (95%) and all Lc. pseudomesenteroides were resistant to at least three antibiotics. Principal component analysis determined that the prevalence of antibiotic resistance in LAB throughout the fermentation process was highly dependent on the fermenter where the fermentation took place. All Lb. pentosus and Lc. pseudomesenteroides strains were highly sensitive to amoxicillin and ampicillin (MIC ≤ 2 μg/ml), and also to chloramphenicol (MIC ≤ 4 μg/ml), gentamicin and erythromycin (MIC ≤ 16 μg/ml). However, they were phenotypically resistant to streptomycin (83–100%, MIC N 256 μg/ml), vancomycin and teicoplanin (70–100%, MIC N 128 μg/ml), trimethoprim (76% of Lb. pentosus and 15% of Lc. pseudomesenteroides, MIC N 128 μg/ml), trimethoprim/sulfomethoxazol (71–100%, MIC N 4–64 μg/ml) and cefuroxime (44% of Lb. pentosus and 85% of Lc. pseudomesenteroides, MIC N 32–128 μg/ml). Lb. pentosus was susceptible to tetracycline and clindamycin, while 46% of Lc. pseudomesenteroides strains were resistant to these antibiotics. Only Lb. pentosus strains were resistant to ciprofloxacin (70%, MIC N 4–64 μg/ml), although no mutations in the quinolone resistance determining regions of the genes encoding GyrA and ParC were found, thus indicating an intrinsic resistance. Similarly, no genes encoding possible transferable resistance determinants for the observed phenotypic resistance were detected by PCR. In some cases, a bimodal distribution of MICs was observed for some antibiotics to which both LAB species exhibited resistance. Nevertheless, such resistances resulted from an intrinsic mechanism, non-transferable or non-acquired resistance determinants which may in part be due to chromosomally encoded efflux pumps (NorA, MepA and MdeA). Results of the present study demonstrate that all Lb. pentosus and Lc. pseudomesenteroides strains lack transferable resistance-related genes (cat, bla, blaZ, ermA, ermB, ermC, msrA/B, ereA, ereB, mphA, mefA, tet(M), tet(O), tet(S), tet(W), tet(L), tet(K), aad(E), aac(6′)-Ie-aph(2′)-Ia, aph(2′)-Ib, aph(2′)-Ic, aph(2′)-Id, aph(3′)-IIIa, ant(4′)-Ia, dfrA, dfrD, vanA, vanB, vanC and vanE) and should therefore, according to Qualified Presumption of Safety criteria, be considered safe for future application as starter cultures or as probiotics.Ítem Application of the broad-spectrum bacteriocin enterocin AS-48 to inhibit Bacillus coagulans in canned fruit and vegetable foods(Elsevier, 2006-05-20) Lucas-López, Rosario; Grande-Burgos, María José; Abriouel, Hikmate; Maqueda, Mercedes; Ben Omar, Nabil; Valdivia, Eva; Martínez-Cañamero, Magdalena; Gálvez, AntonioEl enlatado de alimentos ha sido una forma clásica de proporcionar un suministro continuo de alimentos independientemente de la disponibilidad estacional de materias primas. La acidificación y el tratamiento térmico son dos métodos muy utilizados en la conservación de alimentos enlatados. Sin embargo, varios tipos de bacterias pueden tolerar estas condiciones adversas y proliferar en los alimentos provocando su deterioro. Las bacterias formadoras de endosporas son un problema común en la industria alimentaria porque se encuentran con frecuencia en muchas materias primas y porque las endosporas requieren tratamientos más intensos para su inactivación que las células vegetativas. Esto da como resultado mayores costos de procesamiento y una calidad del producto menos preservada. La supervivencia de las endosporas bacterianas durante el procesamiento de alimentos es de especial importancia en los alimentos enlatados, y a menudo se requieren otros obstáculos adicionales, como la acidificación, para mejorar el crecimiento de las endosporas y el deterioro de los alimentos. Bacillus coagulans es una bacteria de deterioro ligeramente acidófila y termotolerante que genera considerable preocupación durante el procesamiento de alimentos ácidos y acidificados. Esta bacteria puede causar un deterioro “agrio”, debido a la producción de ácido láctico sin formación de gas. Las esporas de B. coagulans pueden germinar y crecer a valores de pH tan bajos como 4, y son importantes en alimentos vegetales ( Brackett, 2001 ) y en frutas enlatadas, especialmente en productos de tomate, con un pH de 4,1 a 5,0. Por esta razón, B. coagulans es el microorganismo aislado con mayor frecuencia de vegetales enlatados en mal estado acidificados a valores de pH entre 4 y 4,5 ( Mallidis et al., 1990 ). En alimentos con pH bajo, B . coagulans también es capaz de aumentar el pH del alimento a valores que puedan permitir la germinación de las esporas supervivientes de C. botulinum ( Fields et al., 1977 , Anderson, 1984 ). Además, esta bacteria también se encuentra frecuentemente en la leche y algunos productos lácteos ( Shehata et al., 1983 , Cosentino et al., 1997 ), y ha estado involucrada en alteraciones como el “agrio plano” de la leche evaporada ( Kalogridou-Vassiliadou, 1992). ) y “coagulación dulce” de leche condensada enlatada ( Carić, 1994 ). Además, también se ha descrito entre las bacterias implicadas en el deterioro del vino por olor a corcho ( Sponholz, 1993 ). La aplicación de bacteriocinas como sustancias antimicrobianas naturales en la bioconservación (el uso de células vivas y/o sus productos con fines de conservación) se ha centrado principalmente en alimentos y productos alimenticios de origen animal ( Stiles, 1996 , Cleveland et al., 2001, Devlieghere et al. ., 2004 ) y se ha trabajado muy poco sobre la aplicación de bacteriocinas para la conservación de alimentos vegetales. Existen escasos informes sobre los efectos de bacteriocinas contra B. coagulans , como el lantibiótico nisina ( Roberts y Hoover, 1996 ) y la bacteriocina enterocócica EJ97 ( Gálvez et al., 1998 , García et al., 2003 ). El péptido cíclico de amplio espectro bacteriocina enterocina AS-48 de Enterococcus faecalis también es activo contra diferentes especies de bacilos ( Gálvez et al., 1986 ). Los diversos estudios realizados sobre esta bacteriocina han contribuido a dilucidar su composición y estructura molecular así como su modo de acción y sus determinantes genéticos (revisado por Maqueda et al., 2004 ). La enterocina AS-48 es resistente al calor, sensible a las proteasas digestivas, no tóxica para las células eucariotas y ofrece un buen potencial para su aplicación en la conservación de alimentos ( Maqueda et al., 2004 ). Recientemente, se han informado resultados satisfactorios en la aplicación de enterocina AS-48 para productos lácteos, carne y jugos de frutas, incluidas bacterias patógenas y/o de deterioro como Staphylococcus aureus , Listeria monocytogenes , Bacillus cereus y Alicyclobacillus sp. ( Muñoz et al., 2004 , Ananou et al., 2005 , Grande et al., 2005a ). El propósito del presente trabajo fue probar la eficacia de la enterocina AS-48 en alimentos vegetales enlatados contra la bacteria de descomposición B. coagulans . Los objetivos específicos fueron determinar la concentración de AS-48 requerida para la inactivación de las células vegetativas de B. coagulans , determinar la influencia de los aditivos (ácido láctico y azúcares) sobre la actividad de la bacteriocina y probar si el efecto letal de los tratamientos térmicos sobre las endosporas de esta bacteria podría potenciarse mediante la adición de bacteriocina.Ítem Application of the broad-spectrum bacteriocin enterocin AS-48 to inhibit Bacillus coagulans in canned fruit and vegetable foods(Elsevier, 2006-05-20) Lucas-López, Rosario; Grande-Burgos, María José; Abriouel, Hikmate; Maqueda, Mercedes; Ben Omar, Nabil; Valdivia, Eva; Martínez-Cañamero, Magdalena; Gálvez-del-Postigo, AntonioEl enlatado de alimentos ha sido una forma clásica de proporcionar un suministro continuo de alimentos independientemente de la disponibilidad estacional de materias primas. La acidificación y el tratamiento térmico son dos métodos muy utilizados en la conservación de alimentos enlatados. Sin embargo, varios tipos de bacterias pueden tolerar estas condiciones adversas y proliferar en los alimentos provocando su deterioro. Las bacterias formadoras de endosporas son un problema común en la industria alimentaria porque se encuentran con frecuencia en muchas materias primas y porque las endosporas requieren tratamientos más intensos para su inactivación que las células vegetativas. Esto da como resultado mayores costos de procesamiento y una calidad del producto menos preservada. La supervivencia de las endosporas bacterianas durante el procesamiento de alimentos es de especial importancia en los alimentos enlatados, y a menudo se requieren otros obstáculos adicionales, como la acidificación, para mejorar el crecimiento de las endosporas y el deterioro de los alimentos. Bacillus coagulans es una bacteria de deterioro ligeramente acidófila y termotolerante que genera considerable preocupación durante el procesamiento de alimentos ácidos y acidificados. Esta bacteria puede causar un deterioro “agrio”, debido a la producción de ácido láctico sin formación de gas. Las esporas de B. coagulans pueden germinar y crecer a valores de pH tan bajos como 4, y son importantes en alimentos vegetales ( Brackett, 2001 ) y en frutas enlatadas, especialmente en productos de tomate, con un pH de 4,1 a 5,0. Por esta razón, B. coagulans es el microorganismo aislado con mayor frecuencia de vegetales enlatados en mal estado acidificados a valores de pH entre 4 y 4,5 ( Mallidis et al., 1990 ). En alimentos con pH bajo, B . coagulans también es capaz de aumentar el pH del alimento a valores que puedan permitir la germinación de las esporas supervivientes de C. botulinum ( Fields et al., 1977 , Anderson, 1984 ). Además, esta bacteria también se encuentra frecuentemente en la leche y algunos productos lácteos ( Shehata et al., 1983 , Cosentino et al., 1997 ), y ha estado involucrada en alteraciones como el “agrio plano” de la leche evaporada ( Kalogridou-Vassiliadou, 1992). ) y “coagulación dulce” de leche condensada enlatada ( Carić, 1994 ). Además, también se ha descrito entre las bacterias implicadas en el deterioro del vino por olor a corcho ( Sponholz, 1993 ). La aplicación de bacteriocinas como sustancias antimicrobianas naturales en la bioconservación (el uso de células vivas y/o sus productos con fines de conservación) se ha centrado principalmente en alimentos y productos alimenticios de origen animal ( Stiles, 1996 , Cleveland et al., 2001, Devlieghere et al. ., 2004 ) y se ha trabajado muy poco sobre la aplicación de bacteriocinas para la conservación de alimentos vegetales. Existen escasos informes sobre los efectos de bacteriocinas contra B. coagulans , como el lantibiótico nisina ( Roberts y Hoover, 1996 ) y la bacteriocina enterocócica EJ97 ( Gálvez et al., 1998 , García et al., 2003 ). El péptido cíclico de amplio espectro bacteriocina enterocina AS-48 de Enterococcus faecalis también es activo contra diferentes especies de bacilos ( Gálvez et al., 1986 ). Los diversos estudios realizados sobre esta bacteriocina han contribuido a dilucidar su composición y estructura molecular así como su modo de acción y sus determinantes genéticos (revisado por Maqueda et al., 2004 ). La enterocina AS-48 es resistente al calor, sensible a las proteasas digestivas, no tóxica para las células eucariotas y ofrece un buen potencial para su aplicación en la conservación de alimentos ( Maqueda et al., 2004 ). Recientemente, se han informado resultados satisfactorios en la aplicación de enterocina AS-48 para productos lácteos, carne y jugos de frutas, incluidas bacterias patógenas y/o de deterioro como Staphylococcus aureus , Listeria monocytogenes , Bacillus cereus y Alicyclobacillus sp. ( Muñoz et al., 2004 , Ananou et al., 2005 , Grande et al., 2005a ). El propósito del presente trabajo fue probar la eficacia de la enterocina AS-48 en alimentos vegetales enlatados contra la bacteria de descomposición B. coagulans . Los objetivos específicos fueron determinar la concentración de AS-48 requerida para la inactivación de las células vegetativas de B. coagulans , determinar la influencia de los aditivos (ácido láctico y azúcares) sobre la actividad de la bacteriocina y probar si el efecto letal de los tratamientos térmicos sobre las endosporas de esta bacteria podría potenciarse mediante la adición de bacteriocina.Ítem Control of Alicyclobacillus acidoterrestris in fruit juices by enterocin AS-48(Elsevier, 2005-03-12) Grande-Burgos, María José; Lucas-López, Rosario; Abriouel, Hikmate; Ben Omar, Nabil; Maqueda, Mercedes; Martínez-Bueno, Manuel; Martínez-Cañamero, Magdalena; Valdivia, Eva; Gálvez, AntonioEn 1984, Cerny et al. informaron sobre un nuevo tipo de bacteria en jugo de manzana envasado asépticamente, posteriormente denominado Bacillus acidoterrestris por Deinhard et al. (1987) . Posteriormente, Wisotzkey et al. (1992) propusieron el nuevo género Alicyclobacillus para incluir esta bacteria. Alicyclobacillus es una bacteria aeróbica móvil, termoacicófila, grampositiva a gramvariable, con forma de bastón, que normalmente contiene ácidos grasos ω-alicíclicos como principal componente lipídico de la membrana ( Yamazaki et al., 1996 , Walls y Chuyate, 1998 ). Los microorganismos del género Alicyclobacillus tienen un rango de pH de crecimiento entre 2,0 y 7,0 y son capaces de crecer en un rango de temperatura de 20 a 70 °C ( Walls y Chuyate, 1998 ). Se ha demostrado que las esporas de Alicyclobacillus resisten ambientes ácidos y altas temperaturas aplicadas en procesos de llenado en caliente utilizados para jugos de frutas y vegetales, lo que convierte a esta bacteria en una causa potencial de deterioro ( Murakami et al., 1998 , Pontius et al., 1998 , Splittstoesser et al., 1994 , Splittstoesser et al., 1998 , Walls y Chuyate, 1998 , Eiroa et al., 1999 , Silva y Gibbs, 2001 ). Alicyclobacillus se ha detectado en una amplia gama de jugos y productos de frutas, así como en instalaciones de procesamiento, donde ingresa muy probablemente a las superficies de frutas contaminadas del suelo durante la producción y la cosecha ( McIntyre et al., 1995 , Wisse y Parish, 1998 , Eiroa et al. otros, 1999 ). Los jugos ácidos, y especialmente el jugo de manzana, son más propensos al deterioro causado por esta bacteria, pero también se ha demostrado que las esporas activadas por el calor crecen en jugos de tomate, manzana, naranja, piña, pomelo y uva blanca ( Petipher et al., 1997). ). El uso de bacteriocinas para la conservación de alimentos ha sido objeto de extensos trabajos en los últimos años ( Giraffa, 1995 , Holzapfel et al., 1995 , Hugas, 1998 , Ennahar et al., 1999 , Cleveland et al., 2001 , O'Sullivan et al., 2002 ), pero la aplicación de bacteriocinas en la conservación de jugos de frutas rara vez se ha estudiado, siendo la nisina la única excepción. En 1999, Komitopoulou et al. informaron sobre la inhibición del crecimiento de esporas por nisina en jugos de manzana, pomelo y naranja, y Yamazaki et al. (2000) también informaron efectos similares en bebidas ácidas inoculadas con esporas de A. acidoterrestris . La enterocina AS-48 es un péptido cíclico de amplio espectro que ha sido ampliamente caracterizado en cuanto a composición química ( Gálvez et al., 1986 , Gálvez et al., 1989a ), estructura molecular ( González et al., 2000 ), determinantes genéticos. ( Martínez-Bueno et al., 1998 ), modo de acción ( Gálvez et al., 1991 ) y actividad antimicrobiana contra bacterias patógenas transmitidas por alimentos ( Gálvez et al., 1989b , Abriouel et al., 1998 , Abriouel et al., 2002 , Mendoza et al., 1999 ). Esta bacteriocina puede considerarse como una alternativa a la nisina para la bioconservación de alimentos. Este trabajo describe la actividad antimicrobiana de la enterocina AS-48 contra células vegetativas y endosporas de Alicyclobacillus acidoterrestris en jugos de frutas bajo diferentes condiciones de almacenamiento.Ítem Diversity, distribution and quantification of antibiotic resistance genes in goat and lamb slaughterhouse surfaces and end products(2014-12-05) Lavilla, Leyre; Benomar El Bakali, Nabil; Knapp, Charles; Correa-Galeote, David; Gálvez-del-Postigo, Antonio; Abriouel, HikmateThe distribution and quantification of tetracycline, sulfonamide and beta-lactam resistance genes were assessed in slaughterhouse zones throughout meat chain production and the meat products; this study represents the first to report quantitatively monitor antibiotic resistance genes (ARG) in goat and lamb slaughterhouse using a culture independent approach, since most studies focused on individual bacterial species and their specific resistance types. Quantitative PCR (qPCR) revealed a high prevalence of tetracycline resistance genes tetA and tetB in almost all slaughterhouse zones. Sulfonamide resistance genes were largely distributed, while beta-lactam resistance genes were less predominant. Statistical analysis revealed that resistant bacteria, in most cases, were spread by the same route in almost all slaughterhouse zones, except for tetB, blaCTX and blaTEM genes, which occurred in few zones as isolated ‘hot spots.’ The sum of all analyzed ARG indicated that slaughterhouse surfaces and end products act as reservoirs of ARG, mainly tet genes, which were more prevalent in slaughtering room (SR), cutting room (CR) and commercial meat products (MP). Resistance gene patterns suggest they were disseminated throughout slaughterhouse zones being also detected in commercial meat products, with significant correlations between different sampling zones/end products and total resistance in SR, CR and white room (WR) zones, and also refrigerator 4 (F4) and MP were observed. Strategically controlling key zones in slaughterhouse (SR, CR and WR) by adequate disinfection methods could strategically reduce the risks of ARG transmission and minimize the issues of food safety and environment contamination.Ítem Efecto de los aceites comestibles sobre las propiedades probióticas de Lactobacillus pentosus aisladas de la fermentación natural de la aceituna aloreña(Jaén : Universidad de Jaén, 2022-06-20) Alonso-García, Esther; Abriouel, Hikmate; Benomar El Bakali, Nabil; Universidad de Jaén. Departamento de Ciencias de la SaludLa adaptación de 7 cepas probióticas de Lactiplantibacillus pentosus aisladas de aceituna de mesa Verde Aloreña a aceites comestibles de origen vegetal aumentó su viabilidad celular y mejoró la resistencia al estrés (condiciones ácidas y biliares). Además, indujo la expresión génica de proteínas multifuncionales implicadas en varias respuestas al estrés y aumentó su funcionalidad probiótica. El análisis transcriptómico de L. pentosus AP2-16 adaptado al aceite de oliva mostró que 125 genes se expresaron significativamente de manera diferencial desviando sus vías metabólicas para equilibrar la producción de energía, el crecimiento y la supervivencia celular y las interacciones con el huésped. Por otro lado, se investigó la resistencia antibiótica de cepas de L. pentosus pre-adaptadas y se reportaron cambios transcripcionales en el probiótico L. pentosus CF2-10 adaptado con aceite de oliva o girasol, desviando sus vías metabólicas para exportar moléculas tóxicas a través de bombas de eflujo y transportadores ABC.Ítem Effect of enterocin AS-48 singly or in combination with biocides on planktonic and sessile B. cereus(Elsevier, 2013-12) Caballero-Gómez, Natacha; Grande-Burgos, María José; Pérez-Pulido, Rubén; Abriouel, Hikmate; Gálvez, AntonioLa enterocina AS-48 se probó sola o en combinación con biocidas en un cóctel de seis cepas de Bacillus cereus en estado planctónico y en biopelículas formadas en placas de microtitulación de poliestireno. Los biocidas probados fueron cloruro de benzalconio, cetrimida, cloruro de hexadecilpiridinio, triclosán, clorhexidina, cloruro de polihexametilen guanidinio y desinfectantes comerciales P3 oxonia y P3 topax 66. El número de supervivientes se determinó después de 60 minutos de incubación con biocidas o combinaciones de biocida y bacteriocina. La adición de enterocina AS-48 (25 mg/l) aumentó la inactivación de las células planctónicas por los compuestos de amonio cuaternario, bisfenoles y biguaninas probados en un rango de concentraciones de biocida de 0,25 a 2,5 g/l, y por 4 g/l de poliguanina. También se observó una mayor inactivación de los bacilos con la combinación de enterocina AS-48 con P3 oxonia al 2,5%, pero no con P3 topax 66. En estado sésil, los bacilos eran más resistentes a los biocidas y también a las combinaciones de bacteriocina-biocida. El cloruro de hexadecilpiridio fue el biocida más activo sobre las biopelículas en los tratamientos individuales. En los tratamientos combinados con 50 mg/l de bacteriocina , hexadecilpiridinio (2,5 g/l), cloruro de polihexametilen guanidinio (4 g/l) y oxonia P3 (2,5%) lograron la inactivación completa de las poblaciones de bacilos. P3 topax 66 mostró el rendimiento más bajo entre todos los tratamientos probados, ya sea solo o en combinación con bacteriocina. Se desafió un cóctel de endosporas con biocidas y enterocina AS-48 durante 60 minutos a temperaturas de 22 °C, 40 °C y 60 °C. La enterocina AS-48 no redujo significativamente ( p > 0,05) los recuentos viables ni aumentó el efecto letal de los biocidas. Sin embargo, los tratamientos con 5 g/l de cloruro de benzalconio a 60 °C, 2,5 g/l de hexadecipiridinio a 60 °C o P3 oxonia al 0,025% y 60 °C o al 0,25% a 22-60 °C lograron la inactivación completa de las endosporas bacterianas. , tanto solos como en combinación con bacteriocina. También se obtuvieron reducciones significativas de los recuentos viables (1-2 ciclos logarítmicos) para algunos tratamientos con cetrimida, triclosán o cloruro de polihexametilenguanidinio, pero no para clorhexidina (hasta 5 g/l) o P3 topax 66 (hasta 1%). Las superficies de poliestireno dosificadas con enterocina AS-48 (25 o 50 mg/l) permanecieron libres de bacilos detectables de 2 a 24 h después de ser inoculadas con un cóctel de endosporas, pero las superficies de acero inoxidable dosificadas con 50 mg/l de bacteriocina no previnieron la aparición de bacterias. crecimiento a partir de endosporas. Los resultados de este estudio sugieren que la enterocina AS-48 podría aplicarse como potenciador de la actividad biocida contra las células planctónicas y sésiles de B. cereus .Ítem Efficacy of Enterocin AS-48 against Bacilli in Ready-to-Eat Vegetable Soups and Purees(Elsevier, 2007-05-14) Grande-Burgos, María José; Abriouel, Hikmate; Lucas-López, Rosario; Valdivia, Eva; Ben Omar, Nabil; Martínez-Cañamero, Magdalena; Gálvez-del-Postigo, AntonioSe probó la bacteriocina enterocina AS-48 de amplio espectro para la bioconservación de alimentos vegetales listos para el consumo (sopas y purés) contra bacterias aeróbicas mesófilas formadoras de endosporas. Al agregar AS-48 (10 microg/ml), Bacillus cereus LWL1 se inhibió completamente en los seis productos vegetales analizados (crema de vegetales naturales, crema de espárragos, sopa tradicional, sopa tradicional casera, sopa de verduras y vichyssoise) durante hasta 30 días a 6, 15 y 22 grados C. Una colección de cepas aisladas de purés en mal estado mostró una resistencia ligeramente mayor a AS-48 en el orden Paenibacillus sp. > Bacillus macroides > B. cereus, aunque también fueron completamente inhibidos en crema vegetal natural por AS-48 a 10 microg/ml. Sin embargo, cócteles de cinco u ocho cepas compuestos por B. cereus (tres cepas), B. macroides (dos cepas) y Paenibacillus sp., Paenibacillus polymyxa y Paenibacillus amylolyticus mostraron una mayor resistencia a la bacteriocina con AS-48 de hasta 50 microg. /ml requerido para la inactivación completa en crema vegetal natural almacenada a 22 grados C. El análisis de PCR extragénico repetitivo basado en secuencia palindrómica (REP-PCR) mostró que paenibacilli (junto con algunos B. cereus) fue el superviviente predominante en los cócteles después del tratamiento con bacteriocina. . Para aumentar la eficacia de la enterocina AS-48, se probó la bacteriocina (a 20 microg/ml) frente al cóctel de ocho cepas en crema de verduras naturales en combinación con otros antimicrobianos. La combinación de AS-48 y nisina tuvo un efecto aditivo leve pero significativo. La actividad bactericida fue potenciada en gran medida por los compuestos fenólicos (carvacrol, eugenol, geraniol y ácido hidrocinámico), logrando una inactivación rápida y completa de los bacilos en el puré probado a 22 grados C.Ítem Estudio de los determinantes genéticos de resistencias a biocidas y su papel en la resistencia cruzada con antibióticos en bacterias de origen alimentario(Jaén : Universidad de Jaén, 2014-11-07) Lavilla, Leyre; Abriouel, Hikmate; Universidad de Jaén. Departamento de Ciencias de la Salud[ES] Nuestro objetivo fue investigar la incidencia de la resistencia a antibióticos y biocidas en bacterias de origen alimentario. Para ello, hemos analizado mediante procedimientos dependientes e independientes de cultivo dicha resistencia a lo largo de la cadena de producción de la carne, así mismo hemos evaluado fenotípicamente y genotípicamente la resistencia en dos grupos microbianos patógenos tales como Pseudomonas sp. y Enterococcus sp. Nuestros resultados indicaron una alta resistencia a antibóticos de uso común en la clínica y biocidas frecuentemente usados en la industria alimentaria, así mismo hemos revelado los mecanismos moleculares implicados en dicha resistencia (genes específicos y bombas de exporte). Además, mediante estudios estadísticos, hemos determinado la interconexión entre ambos antimicrobianos la cual se ve reflejada por una resistencia cruzada entre algunos biocidas y antibióticos sugiriendo así que tipo de medidas a adoptar para evitar la diseminación de genes de resistencia a lo largo de la cadena alimentaria.Ítem Estudio de resistencias a biocidas y antibióticos en bacterias procedentes de alimentos ecológicos(Jaén : Universidad de Jaén, 2014) Fernández-Fuentes, Miguel Ángel; Ortega-Morente, Elena; Abriouel, Hikmate; Gálvez-del-Postigo, Antonio; Universidad de Jaén. Departamento de Ciencias de la Salud[ES] Se ha estudiado la sensibilidad frente a antibióticos y biocidas de bacterias procedentes de alimentos ecológicos. En las cepas resistentes a varios biocidas y/o antibióticos se ha investigado la presencia de determinantes de resistencia . Se ha estudiado también el posible efecto sinérgico entre ambos tipos de compuestos en cepas bacterianas resistentes a biocidas y antibióticos. Los resultados obtenidos sugieren que los alimentos ecológicos pueden actuar como reservorio de bacterias resistentes a antibióticos y tolerantes a biocidas, en las cuales los principales determinantes de resistencia son las bombas de exporte inespecíficas. También se han descrito importantes efectos sinérgicos entre diferentes biocidas y antibióticos frente a bacterias resistentes procedentes de alimentos ecológicos, lo que abre nuevas posibilidades para el control de estos microorganismos.Ítem Estudio genómico y proteómico de cepas probióticas de Lactobacillus pentosus aisladas de aceitunas aloreña fermentadas(Jaén : Universidad de Jaén, 2017-07-20) Pérez-Montoro, Beatriz; Abriouel, Hikmate; Benomar El Bakali, Nabil; Universidad de Jaén. Departamento de Ciencias de la SaludNuestro objetivo fue analizar en profundidad las propiedades probióticas de las cepas de Lactobacillus pentosus aisladas de la fermentación natural de la aceituna Aloreña para así seleccionar cepas con el mejor potencial probiótico. Una vez seleccionada la cepa, se procedió a su caracterización a nivel genómico. En este sentido, el análisis in silico del genoma de L. pentosus MP-10 nos permitió determinar los genes implicados en las propiedades probióticas así como aquellos implicados en la seguridad y defensa de la cepa. De otra parte, los análisis proteómicos permitieron determinar que la respuesta de las cepas de L. pentosus a los ácidos fue dependiente del fenotipo considerado y de las condiciones del cultivo, así el análisis del repertorio de genes inducidos y reprimidos permitieron determinar por primera vez los biomarcadores de resistencia a la acidez en la especie L. pentosus siendo además implicados en otras propiedades probióticas tales como la auto-agregación.Ítem Influence of a diet enriched with virgin olive oil or butter on mouse gut microbiota and its correlation to physiological and biochemical parameters related to metabolic syndrome(PUBLIC LIBRARY SCIENCE, 2018-01) Prieto-Gómez, Maria Isabel; Hidalgo, Marina; Segarra, Ana Belén; Martínez-Rodríguez, Ana María; Cobo, Antonio; Ramírez-Sánchez, Manuel; Abriouel, Hikmate; Gálvez, Antonio; Martínez-Cañamero, MagdalenaThe type of fat in the diet determinates the characteristics of gut microbiota, exerting a major role in the development of metabolic syndrome. We hypothesize that a diet enriched with extra virgin olive oil (EVOO) has a distinctive effect on the intestinal microbiome in comparison with an enriched butter diet (BT) and this effect is related to the physiological benefits exerted by EVOO. Swiss Webster mice were fed standard (SD) or two high fat diets enriched with EVOO or butter. Hormonal, physiological and metabolic parameters were evaluated. At the end of the feeding period, DNA was extracted from faeces and the 16S rRNA genes were pyrosequenced. Among the main significant differences found, BT triggered the highest values of systolic blood pressure, correlating positively with the percentage of Desulfovibrio sequences in faeces, which in turn showed significantly higher values in BT than in EVOO. EVOO had the lowest values of plasmatic insulin, correlating inversely with Desulfovibrio, and had the lowest plasmatic values of leptin which correlated inversely with Sutterellaceae, Marispirillum and Mucilaginibacter dageonensis, the three showing significantly higher percentages in EVOO. The lowest total cholesterol levels in plasma were detected in SD, correlating positively with Prevotella and Fusicatenibacter, both taxa with significantly greater presence in SD. These results may be indicative of a link between specific diets, certain physiological parameters and the prevalence of some taxa, supporting the possibility that in some of the proposed effects of virgin olive oil the modulation of intestinal microbiota could be involved. © 2018 Prieto et al. This is an open access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original author and source are credited.Ítem Inhibition of Bacillus licheniformis LMG 19409 from ropy cider by enterocin AS-48(2006-08-01) Grande-Burgos, María José; Lucas-López, Rosario; Abriouel, Hikmate; Valdivia, Eva; Ben Omar, Nabil; Maqueda, Mercedes; Martíneza-Cañamero, Magdalena; Gálvez, AntonioAims: To determine the activity of enterocin AS-48 against ropy-forming Bacil-lus licheniformis from cider.Methods and Results: Enterocin AS-48 was tested on B. licheniformis LMG19409 from ropy cider in MRS-G broth, fresh-made apple juice and in twocommercial apple ciders (A and B). Bacillus licheniformis was rapidly inacti-vated in MRS-G by 0Æ5 lg ml)1 AS-48 and in fresh-made apple juice by3 lg ml)1 . Concentration-dependent inactivation of this bacterium in twocommercial apple ciders (A and B) stored at 4, 15 and 30°C for 15 days wasalso demonstrated. Counts from heat-activated endospores in cider A plusAS-48 decreased very slowly. Application of combined treatments of heat(95°C) and enterocin AS-48 reduced the time required to achieved completeinactivation of intact spores in cider A to 4 min for 6 lg ml)1 and to 1 minfor 12 lg ml)1 . D and z values also decreased as the bacteriocin concentrationincreased.Conclusion: Enterocin AS-48 can inhibit ropy-forming B. licheniformis in applecider and increase the heat sensitivity of spores.Significance and Impact of the Study: Results from this study support thepotential use of enterocin AS-48 to control B. licheniformis in apple cider.Ítem Inhibition of toxicogenic Bacillus cereus in rice-based foods by enterocin AS-48(Elsevier, 2005-08-01) Grande-Burgos, María José; Abriouel, Hikmate; Valdia, Eva; Ben Omar, Nabil; Maqueda, Mercedes; Martínez-Bueno, Manuel; Martínez-Cañamero, Magdalena; Gálvez, AntonioEl efecto antimicrobiano de la bacteriocina enterocina AS-48 de amplio espectro contra la cepa psicrotrófica toxicogénica Bacillus cereus LWL1 se ha investigado en un sistema alimentario modelo que consiste en arroz hervido y en una papilla infantil comercial a base de arroz disuelta en leche entera almacenada a temperaturas de 37°C, 15°C y 6°C. En muestras de alimentos suplementadas con enterocina AS-48 (en un rango de concentración de 20 a 35 μg/ml), los recuentos de células viables disminuyeron rápidamente durante el tiempo de incubación, dependiendo de la concentración de bacteriocina, la temperatura de incubación y la muestra de alimento. También se inhibió la producción de enterotoxinas a 37 °C. La sensibilidad al calor de las endosporas aumentó notablemente en muestras de alimentos suplementadas con enterocina AS-48: la inactivación de las endosporas se logró calentando durante 1 min a 90 °C en arroz hervido o a 95 °C en gachas a base de arroz. La actividad de la enterocina AS-48 en las gachas de arroz fue potenciada por el lactato de sodio de forma dependiente de la concentración.Ítem Multilocus Sequence Typing of Enterococcus faecalis from Vegetable Foods Reveals Two New Sequence Types(Mary Ann Liebert, 2009-04-02) Grande-Burgos, María José; Lucas-López, Rosario; Abriouel, Hikmate; Ben Omar, Nabil; Gálvez, AntonioA collection of 16 isolates of Enterococcus faecalis from different vegetable foods were characterized by multilocus sequence typing (MLST). One isolate belonged to sequence type (ST) 9 of the previously described clonal complex 9, which is frequently associated with hospital environments. The rest of the isolates were grouped into two new STs named 168 and 169. ST168 represented a singleton clone that included 14 isolates and seemed to be the predominant type among E. faecalis from vegetable samples. ST168 was closely related to ST72, differing only by one allele type. Singleton ST169 was not related to any of the previously described STs. © 2009, Mary Ann Liebert, Inc.Ítem Phenotypic and molecular antibiotic resistance profile of Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium isolated from different traditional fermented foods.(Mary Ann Liebert, 2013) Sánchez-Valenzuela, Antonio; Lavilla, Leyre; Benomar El Bakali, Nabil; Gálvez-del-Postigo, Antonio; Pérez-Pulido, Rubén; Abriouel, HikmateA collection of 55 enterococci (41 Enterococcus faecium and 14 E. faecalis strains) isolated from various traditional fermented foodstuffs of both animal and vegetable origins, and water was evaluated for resistance against 15 antibiotics. Lower incidence of resistance was observed with gentamicin, ampicillin, penicillin and teicoplanin. However, a high incidence of antibiotic resistance was detected for rifampicin (12 out of 14 of isolates), ciprofloxacin (9/14), and quinupristin/dalfopristin (8/14) in E. faecalis strains. Enterococcus faecium isolates were resistant to rifampicin (25/41), ciprofloxacin (23/41), erythromycin (18/41), levofloxacin (16/41), and nitrofurantoin (15/41). One Enterococcus faecalis and two E. faecium strains were resistant to vancomycin (MIC > 16 lg/mL). Among 55 isolates, 27 (19 E. faecium and eight E. faecalis) were resistant to at least three antibiotics. High level of multidrug resistance to clinically important antibiotics was detected in E. faecalis strains (57% of E. faecalis versus 46% of E. faecium), which showed resistance to six to seven antibiotics, especially those isolated from foods of animal origin. So, it is necessary to re-evaluate the use of therapeutic antibiotics in stock farms at both regional and international levels due to the high number of multiple resistant (MR) bacteria. Fiftysix MR E. faecalis and E. faecium strains selected from this and previous studies (Valenzuela et al., 2008, 2010) were screened by polymerase chain reaction for antibiotic resistance genes, revealing the presence of tet(L), tet(M), ermB, cat, efrA, efrB, mphA, or msrA/B genes. The ABC Multidrug Efflux Pump EfrAB was detected in 96% of E. faecalis strains and also in 13% of E. faecium strains; this is the first report describing EfrAB in this enterococcal species. The efflux pump–associated msrA/B gene was detected in 66.66% of E. faecium strains, but not in E. faecalis strains.Ítem Role of EFRAB efflux pump in biocide tolerance and antibiotic resistance of Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium isolated from traditional fermented foods and the effect of EDTA as EFRAB inhibitor.(Science Direct (Elsevier), 2014-12) Lavilla, Leyre; Benomar El Bakali, Nabil; Sánchez-Valenzuela, Antonio; Casado-Muñoz, María Carmen; Gálvez-del-Postigo, Antonio; Abriouel, HikmateEnterococcus faecalis and Enterococcus faecium isolated from various traditional fermented foods of both animal and vegetable origins have shown multidrug resistance to several antibiotics and tolerance to biocides. Reduced susceptibility was intra and inter-species dependent and was due to specific and unspecific mechanisms such as efflux pumps. EfrAB, a heterodimeric ABC transporter efflux pump, was detected in 100% of multidrug resistant (MDR) E. faecalis strains and only in 12% of MDR E. faecium strains. EfrAB expression was induced by half of minimum inhibitory concentration (MIC) of gentamicin, streptomycin and chloramphenicol. However, expression of efrA and efrB genes was highly dependent on the strain tested and on the antimicrobial used. Our results indicated that 3 mM EDTA highly reduced the MICs of almost all drugs tested. Nevertheless, the higher reductions (>8 folds) were obtained with gentamicin, streptomycin, chlorhexidine and triclosan. Reductions of MICs were correlated with downregulation of EfrAB expression (10e140 folds) in all three MDR enterococci strains. This is the first report describing the role of EfrAB in the efflux of antibiotics and biocides which reflect also the importance of EfrAB in multidrug resistance in enterococci. EDTA used at low concentration as food preservative could be one of the best choices to prevent spread of multidrug resistant enterococci throughout food chain by decreasing EfrAB expression. EfrAB could be an attractive target not only in enterococci present in food matrix but also those causing infections as well by using EDTA as therapeutic agent in combination with low doses of antibiotics.Ítem Stability of Enterocin AS-48 in Fruit and Vegetable Juices(Elsevier, 2005-04-15) Grande-Burgos, María José; Lucas-López, Rosario; Valdivia, Eva; Abriouel, Hikmate; Maqueda, Mercedes; Ben Omar, Nabil; Martínez-Cañamero, Magdalena; Gálvez, AntonioLa enterocina AS-48 es una bacteriocina candidata para la bioconservación de alimentos. Antes de abordar la aplicación de AS-48 a alimentos de origen vegetal, se estudió la interacción entre AS-48 y los componentes de alimentos vegetales y la estabilidad de AS-48. La enterocina AS-48 tuvo interacciones variables con jugos de frutas y verduras, con pérdida de actividad completa, parcial o insignificante. Para algunos jugos, la pérdida de actividad mejoró aumentando la concentración de bacteriocina, diluyendo el jugo o aplicando un pretratamiento térmico. En los jugos obtenidos de repollo, coliflor, lechuga, judías verdes, apio y aguacate, el AS-48 fue muy estable durante las primeras 24 a 48 h de almacenamiento en refrigeración, y la disminución de la actividad estuvo marcadamente influenciada por la temperatura de almacenamiento. En jugos de frutas recién hechos (naranja, manzana, pomelo, pera, piña y kiwi) y mezclas de jugos, el AS-48 fue muy estable durante al menos 15 días a 4°C, y la actividad de la bacteriocina aún era detectable después de 30 días de uso. almacenamiento. Se produjo una pérdida gradual y variable de actividad en los jugos almacenados a 15 y 28°C; la inactivación fue más rápida a temperaturas más altas. En los jugos de frutas comerciales (naranja, manzana, durazno y piña) almacenados a 4°C, la bacteriocina se mantuvo completamente estable por hasta 120 días, y más del 60% de la actividad inicial todavía estaba presente en los jugos almacenados a 15°C durante el primer año. Mismo periodo. Los jugos de frutas comerciales almacenados a 28°C durante 120 días retuvieron entre el 31,5% (manzana) y el 67,71% (melocotón) de su actividad bacteriocina inicial. Las soluciones de AS-48 en agua destilada estéril fueron estables (120 días de 4 a 28°C). Se observó una pérdida limitada de actividad después de mezclar AS-48 con algunos colorantes y agentes espesantes de calidad alimentaria. La enterocina AS-48 agregada al jugo de lechuga incubada a 15 °C redujo los recuentos viables de Listeria monocytogenes CECT 4032 y Bacillus cereus LWL1 por debajo de los límites de detección y redujo notablemente los recuentos viables de Staphylococcus aureus CECT 976.